叶绿素含量测定(叶绿素含量测定实验误差分析)
大家好,关于叶绿素含量测定很多朋友都还不太明白,不知道是什么意思,那么今天我就来为大家分享一下关于叶绿素含量测定实验误差分析的相关知识,文章篇幅可能较长,还望大家耐心阅读,希望本篇文章对各位有所帮助!
1叶绿体色素含量的测定
1、一般,植物叶绿素含量测定有三种:分光光度法,活体叶绿素仪法和光声光谱法。其中分光光度法是应用最广泛的叶绿素含量测定方法。
2、用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至100ml,摇匀。 取叶绿体色素提取液在波长665nm、645nm 和652nm 下测定吸光度,以95%乙醇为空白对照。
3、根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长下测定其消光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。
4、利用(7)式或(9)式可计算叶绿素总量。叶绿体色素的提取液中除含有叶绿素a与b外,还含有叶黄素和胡萝卜素,因为叶黄素和胡萝卜素的吸收光谱均在蓝光区,故不会干扰叶绿素含量在红光区的分光光度法测定。
5、用叶绿体色素提取色素并测定叶绿素的含量。利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性,可用 95%乙醇提取。 分离色素的方法有多种,如纸层析、柱层析等。纸层析是其中最简单的一种。
2叶绿素含量的测定及计算结果
利用分光光度法测定叶绿素含量是依据Lambert-Beer定律,数学表达式为A=Kbc。其中,A为吸光度;K为吸光系数;b为溶液的厚度;c为溶液浓度。叶绿素a,b的丙酮溶液在可见光范围内的最大吸收峰分别在663nm和645nm处。
步骤: (1)将取自叶片的样品加入95%乙醇,研磨均匀; (2)离心沉淀后,用分光光度计分别在663nm和645nm两个波长下测定提取液的吸光度; (3)根据计算公式计算出叶绿素a和叶绿素b的含量。
纸层析后,按照溶解性的顺序排列,最上面是胡萝卜素,再者是叶黄素,叶绿素a,叶绿素b.按照含量来排,最多的是叶绿素a,其次是叶绿素b,第三是叶黄素,胡萝卜素最少。
选出叶片叶绿素a、叶绿素b和SPAD值同时测定的最优波长,即选择预测相对标准误差最小的波长组合。
实验结果计算:将测定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=195A665-88A649;Cb=296A649-32A665。据此即可得到叶绿素a和叶绿素b的浓度(Ca、Cb:mg/L),二者之和为总叶绿素的浓度。
实验结果计算:将测定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=195A665-88A649;Cb=296A649-32A665。据此即可得到叶绿素a和叶绿素b的浓度(Ca、Cb:mg/L),二者之和为总叶绿素的浓度。
3叶绿素含量测定
1、叶绿素含量的测定方法主要有紫外分光光度法、荧光分析法、活体叶绿素仪法、光声光谱法和高效液相色谱法。不过目前应用最为广泛的还是分光光度法。
2、酒精法测定叶绿素含量 原理:将叶片样品用乙醇等有机溶剂提取叶绿素,然后用分光光度计在不同波长下测定叶绿素的吸光度,计算出叶绿素含量。
3、叶绿素含量的测定方法:分光光度法。分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点,是生物化学实验中最常用的实验方法。
4、叶绿素含量的测定及计算结果如下:叶绿素a、b在红光区的最大吸收峰分别为663nm和645nm,可用以下联立方程求叶绿素溶液中的叶绿素a、b的含量。
4叶绿素含量的测定
叶绿素含量的测定方法主要有紫外分光光度法、荧光分析法、活体叶绿素仪法、光声光谱法和高效液相色谱法。不过目前应用最为广泛的还是分光光度法。
酒精法测定叶绿素含量 原理:将叶片样品用乙醇等有机溶剂提取叶绿素,然后用分光光度计在不同波长下测定叶绿素的吸光度,计算出叶绿素含量。
叶绿素含量的测定方法:分光光度法。分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点,是生物化学实验中最常用的实验方法。
叶绿素含量的测定,叶绿素的含量与植物光合作用及氮素营养有密切的关系,在科学施肥、育种 及植物病理研究上常有测定的需要。目的 掌握叶绿素a、b 含量测定的基本原理和方法。
好了,文章到此结束,希望可以帮助到大家。