原代细胞培养（小鼠原代细胞培养）

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1原代细胞和传代细胞培养有哪些区别

1、传代细胞实质上也是细胞经原代培养后使之永生化不断传代而来。因此，传代细胞容易增殖，也容易存活，一般普通培养条件下都可以。而原代培养是从活体组织或器官中分离单一细胞进行培养，过程相对复杂，培养条件要求也更高。

2、概念不同 原代细胞：指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。传代细胞：适应在体外培养条件下持续传代培养的细胞称为传代细胞。

3、原代培养和传代培养的区别：原代培养的字面意思即第1次培养，但实际上，通常把第1代至第10代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。传代培养是第10代-第50代培养，这个时候是细胞株。

4、一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。

5、在细胞培养过程中从开始在一个瓶中培养的细胞称为原代细胞，当细胞增殖到一定程度产生接触抑制时，就需要分装到不同瓶是培养，分装后的培养细胞称为传代细胞。

6、体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。

2什么是原代培养

原代培养：将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。

原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养，也称初代培养。严格地说即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。一般持续1一4周。

原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养，也叫初代培养。传代培养是指需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养的过程。

3细胞外泌体收集之前用什么样的培养液

1、多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。液基细胞保存液 是液基细胞学检测技术(Thin-Cytologic Test TCT)主要耗材。

2、未经处理的FBS中含有大量的外源外泌体，所以细胞培养一定要用经过处理不含外泌体的FBS。唾液 唾液的成分会因取样的位置和时间不同而不同，所以同血样一样需定点定时。

3、原代培养细胞接种密度需适当提高，应尽可能用营养丰富的培养液，如使用胎牛血清。这些都属于一般优化条件。细胞培养条件优化的原则是：根据细胞类型， 模拟体内环境， 添加不同的细胞生长因子及有利于细胞生存、增殖的添加剂。

4、适用性：适用于从细胞培养液或血清等样本中提取外泌体。外泌体富集试剂盒（ExoQuick）。原理：利用一种特殊的聚合物材料，将外泌体富集到一个小体积中。

5、就是在收集准备提取外泌体的条件培养基或者血清时，一定要提前做到低速离心和普通高速离心这一步，尤其是为了做透射电镜或者蛋白免疫印迹实验而提取的外泌体 ，一定要注意这一点。

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