蛋白纯化(蛋白纯化的原理)
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1蛋白质分离纯化常用的方法?
1、透析与超滤:透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。超滤法是利用高压力或离心力,强使水和其他小的溶质分子通过半透膜,而蛋白质留在膜上,可选择不同孔径的泸膜截留不同分子量的蛋白质。
2、【答案】:D 本题要点是蛋白质分离纯化的主要方法。蛋白质分离纯化的主要有盐析、透析、超离心、电泳、离子交换层析、分子筛。
3、【答案】:蛋白质分离纯化的主要方法:①盐析 根据性质:蛋白质的沉淀。作用机制:中性盐中和表面电荷,破坏水化层。影响因素:表面电荷、水化层、溶剂性质。②电泳 根据性质:蛋白质的两性解离。
4、纯化蛋白质的方法有:沉淀、电泳、透析、层析、超速离心等。沉淀。电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。
5、蛋白质沉淀剂:蛋白质沉淀剂仅对一类或一种蛋白质沉淀起作用,常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。聚乙二醇沉淀作用:聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。
6、常用的蛋白质纯化方法有离子交换色谱、亲和色谱、电泳、疏水色谱等等 离子交换色谱:蛋白质和氨基酸一样会两性解离,所带电荷决定于溶液pH。pH小于pI时蛋白质带正电,pH大于pI时蛋白质带负电。
2蛋白质分离纯化的方法及原理
1、蛋白质分离纯化的方法及原理,利用分子大小。透析:原理:利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质,使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开。
2、蛋白质分离纯化常用方法有:沉淀,电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。
3、常见的分离提纯蛋白质的方法有:盐析与有机溶剂沉淀:在蛋白质溶液中加入大量中性盐,以破坏蛋白质的胶体性质,使蛋白质从溶液中沉淀析出,称为盐析。常用的中性盐有:硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等。
3蛋白质分离纯化的四种方法
蛋白质分离纯化常用方法有:沉淀,电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。
透析与超滤:透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。超滤法是利用高压力或离心力,强使水和其他小的溶质分子通过半透膜,而蛋白质留在膜上,可选择不同孔径的泸膜截留不同分子量的蛋白质。
【答案】:D 本题要点是蛋白质分离纯化的主要方法。蛋白质分离纯化的主要有盐析、透析、超离心、电泳、离子交换层析、分子筛。
【答案】:蛋白质分离纯化的主要方法:①盐析 根据性质:蛋白质的沉淀。作用机制:中性盐中和表面电荷,破坏水化层。影响因素:表面电荷、水化层、溶剂性质。②电泳 根据性质:蛋白质的两性解离。
4常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种
常用的蛋白质纯化方法有离子交换色谱、亲和色谱、电泳、疏水色谱等等 离子交换色谱:蛋白质和氨基酸一样会两性解离,所带电荷决定于溶液pH。pH小于pI时蛋白质带正电,pH大于pI时蛋白质带负电。
常见的蛋白分离纯化方法:盐析法、盐析法、离子交换层析法、亲和层析法、凝胶电泳法、高效液相色谱法。盐析法:利用不同蛋白质对盐浓度的敏感性差异,通过逐渐加入盐类使蛋白质沉淀析出,再通过离心去除沉淀物。
【答案】:D 本题要点是蛋白质分离纯化的主要方法。蛋白质分离纯化的主要有盐析、透析、超离心、电泳、离子交换层析、分子筛。
纯化蛋白质的方法有:沉淀、电泳、透析、层析、超速离心等。沉淀。电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。
【答案】:蛋白质分离纯化的主要方法:①盐析 根据性质:蛋白质的沉淀。作用机制:中性盐中和表面电荷,破坏水化层。影响因素:表面电荷、水化层、溶剂性质。②电泳 根据性质:蛋白质的两性解离。
蛋白质分离纯化常用方法有:沉淀,电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。
5为什么要对蛋白质纯化
对蛋白质分子进行分析。蛋白质是组成人体一切细胞、组织的重要成分。由于其体内含有大量分子,为了对蛋白质分子进行分析,所以要进分离纯化与鉴定,蛋白质约占人体全部质量的18%,最重要的还是其与生命现象有关。
原理是:与水互溶的有机溶剂(如甲醇、乙醇)能使一些蛋白质在水中的溶解度显著降低;而且在一定温度、pH值和离子强度下,引起蛋白质沉淀的有机溶剂的浓度不同,因此,控制有机溶剂的浓度可以分离纯化蛋白质。
等条件下进行,与蛋白质类似,酶易在溶液表面或界面处形成薄膜而变性,因此操作中应尽量减少泡沫形成,此外重金属易使酶失效,有机溶剂能使酶变性,微生物污染以及蛋白水解酶的存在能使酶分解破坏,这些都应予以足够的重视。
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