rna提取（rna提取中氯仿的作用）

大家好，今天本篇文章就来给大家分享rna提取，以及rna提取中氯仿的作用对应的知识和见解，内容偏长哪个，大家要耐心看完哦，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。

1RNA提取的注意事项

1、避免碱性缓冲液，因为RNA 中的羟基对碱非常敏感。 将RNA 缓冲液与其他缓冲液分开放置，避免用错或被RNases 污染。

2、)、准备冻存管、冻存盒放置需液氮中保存的样品。2)、液氮中有三个取液氮容器，不宜直接将冻存管放于液氮罐中，这样会使 冻存管漂浮起来。固可用纱布、棉线将取氮容器口封住，保存样品。3)、取样品时，需要使用研钵。

3、RNA提取的时候，一定要注意防止RNA酶作用。第一点，样本处理和存放最好都放负80冰柜。第二点，实验过程中你可以使用DEPC水泡过的枪头，离心管，保持手套干净，带好口罩，不要说话。

4、跑胶验证RNA完整性（理论上在提取RNA后，不仅应该测量吸光度的比值，也应当跑胶进行完整性验证。

5、注意枪头管子里的RNA酶，注意你唾沫星子皮肤上存在的RNA酶，注意各种试剂中存在的RNA酶。 重要的事情说三遍。 剩下就是最后一步吸干点，吹干点，但别吹太过了。

2呵呵,提取RNA过程?

1、它利用盐酸胍抑制RNA酶，匀浆裂解细胞，有机溶剂抽提去除蛋白质，通过选择性沉淀RNA分子而去除DNA，提取的RNA质量较好，但整个操作过程繁杂费时。氯化锂-尿素法。

2、枪头、离心管等DEPC水浸泡处理12小时后，高温灭菌30分钟（也可不用DEPC处理，常规高温灭菌40分钟），整个处理过程必须带手套（最好带口罩），否则环境中的RNA酶会降解RNA。

3、将上述提取液用自来水冷却后，装入大离心管内，以4000r／min离心10min，使提取液与菌体残渣等分离。

3RNA的提取方法

常见的的总RNA提取方法有苯酚法、阴离子去污剂法、LiCl一尿素法、改良的Gomez法、异硫氢酸胍法、CTAB法、热硼酸法及改良热硼酸法、TRIZOL试剂快速提取法。

它利用盐酸胍抑制RNA酶，匀浆裂解细胞，有机溶剂抽提去除蛋白质，通过选择性沉淀RNA分子而去除DNA，提取的RNA质量较好，但整个操作过程繁杂费时。氯化锂-尿素法。

RNA抽取一般使用Trizol法抽提：Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。

样品处理（1） 组织：50-100mg组织中加入1ml TROzlo试剂。（2） 单层细胞：加入TROzlo试剂1ml/cm2平板。（3） 悬浮细胞：处理前洗涤细胞，以防止RNA降解。

每1ml TRIzol加入200μl氯仿，剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min，自然分相。4℃ 12，000rpm离心10-15min。

．分离 将上述提取液用自来水冷却后，装入大离心管内，以4000r／min离心10min，使提取液与菌体残渣等分离。

4RNA提取方法?

1、常见的的总RNA提取方法有苯酚法、阴离子去污剂法、LiCl一尿素法、改良的Gomez法、异硫氢酸胍法、CTAB法、热硼酸法及改良热硼酸法、TRIZOL试剂快速提取法。

2、常见的RNA提取方法有苯酚法、阴离子去污剂法、LiCl一尿素法、改良的Gomez法、异硫氢酸胍法、CTAB法、热硼酸法及改良热硼酸法、TRIZOL试剂快速提取法。

3、它利用盐酸胍抑制RNA酶，匀浆裂解细胞，有机溶剂抽提去除蛋白质，通过选择性沉淀RNA分子而去除DNA，提取的RNA质量较好，但整个操作过程繁杂费时。氯化锂-尿素法。

4、RNA抽取一般使用Trizol法抽提：Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。

5、．分离 将上述提取液用自来水冷却后，装入大离心管内，以4000r／min离心10min，使提取液与菌体残渣等分离。

6、样品处理（1） 组织：50-100mg组织中加入1ml TROzlo试剂。（2） 单层细胞：加入TROzlo试剂1ml/cm2平板。（3） 悬浮细胞：处理前洗涤细胞，以防止RNA降解。

5提取血液的RNA怎么提取

在4℃下，12000rpm离心10min。取上清至新的2毫升离心管中，加入2倍体积的酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），剧烈震荡15s，室温放置3min，使其自然分相。

像以上全血的RNA提取有两种思路：1）直接处理抗凝的全血，即加入如Trizol的裂解液直接往下做。

选择5ML新鲜的血液，最好用肝素抗凝 可以选择溶红素（BD公司的）或红细胞裂解液按一定的比例（1：3或1：5）分离白细胞。同正常细胞、组织RNA提取.D：全血提RNA试剂 如TRIzol LS 、RNAtrip LS 等。

取出洗涤液，按以下操作：洗涤液：10mL 加入 24mL 无水乙醇，混匀；20mL 加入 48mL 无水乙醇，混匀。

步骤 2～5应在冰上尽可能快速进行，时间过长会导致样品RNA降解 。 在临床手术过程中采集的病理或正常样品，如果没有条件立即从手术室中取出进行后续处理，请在切除后立即转移到液氮中保存。

a)洗涤液A：21mL加入9mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇。b) 洗涤液B：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。

好了，文章到此结束，希望可以帮助到大家。